实验目的
开发新型止血材料:制备一种双组分纳米和微纤维气凝胶(NMA),结合聚乳酸(PLA)纳米纤维和聚己内酯(PCL)微纤维,通过优化其机械性能和孔隙结构,实现对深部交界性出血的高效控制。
性能验证:通过体外和体内实验,验证NMA的快速形状恢复能力、高血液吸收率、凝血效率及机械稳定性,并与市售产品(XStat®和QuikClot® Combat Gauze)进行对比。
动物模型验证:在猪的致死性及交界性出血模型中评估NMA的即时止血效果、生存率及无再出血特性。
实验步骤
1. 气凝胶制备
纳米纤维(PLA)制备:
静电纺丝:将PLA溶解于二氯甲烷(DCM)和N,N-二甲基甲酰胺(DMF)混合溶液中,加入Pluronic F-127增强亲水性,通过静电纺丝(电压15–18 kV,流速0.6–0.9 mL/h)生成纳米纤维膜。
等离子处理与冷冻切割:纳米纤维膜经空气等离子清洗机Harrick PDC-001-HP处理后,使用冷冻切片机切割成短纤维(长度60 μm、30 μm、20 μm)。
微纤维(PCL)制备:
湿法纺丝:将PCL溶液通过3D打印多针头挤出至乙醇凝固浴中,形成微纤维束。
切割与分散:微纤维经液氮冷冻切割后分散于水中。
气凝胶组装:
将PLA纳米纤维和PCL微纤维按50:50重量比混合,加入1%明胶颗粒,均质化后注入圆柱形模具,冷冻干燥(-80°C,12小时)。
交联处理:使用2.5%戊二醛蒸汽交联6–18小时以增强稳定性。
2. 物理表征
形貌分析:
SEM(FEI Quanta 200):观察气凝胶表面和截面的纤维交织结构与孔隙分布。
Micro-CT(Bruker SkyScan 1276):三维重建气凝胶孔隙结构,分析开放孔与闭合孔比例。
机械性能测试:
压缩测试(Instron 5640万能试验机):评估气凝胶在不同应变(20%–90%)下的压缩力、弹性模量及循环压缩耐久性。
流体动力学模拟(ANSYS 2024):分析NMA和XStat®的血液流动分布及壁面剪切应力。
3. 体外止血性能评估
血液吸收测试:测量气凝胶在接触血液后的吸收速率和容量,并与XStat®对比。
凝血实验:
凝血指数(BCI):通过分光光度计(Multiscan™ FC)测定凝血效率。
血小板和红细胞黏附:SEM观察血细胞在气凝胶表面的聚集与活化状态。
凝血途径分析:测定凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血活酶时间(aPTT)。
4. 体内动物实验
猪模型建立:
手术步骤:对约克夏猪(体重41 kg,n=5)行脾切除术、膀胱造瘘术,并横断右股动静脉模拟致死性出血。
分组处理:对照组(无治疗)、XStat®组、QuikClot®组、NMA组。
止血效果评估:
生存率与出血量:记录180分钟内生存率及术后出血量。
血流动力学监测:监测平均动脉压(MAP)、心率、血气分析等指标。
仪器名称 | 用途 | 型号/供应商 |
等离子清洗机 | 用于增强气凝胶表面的活性,促进交联反应 | PDC-002-HP 迈可诺 |
关键结论
NMA在猪模型中实现了100%生存率、即时止血(5秒内形状恢复)及无再出血,其机械性能(韧性2061 KJ/m³)和血液吸收速率显著优于市售产品,为战场和紧急医疗中的深部出血控制提供了创新解决方案。
论文引用doi.org/10.1038/s41467-025-57836-0
Harrick等离子清洗机
Harrick等离子清洗机是台式等离子处理设备领域,专为实验室和研发用途而设计,被5000多篇技术文章和近200项ZL引用,广泛应用于表面工程应用,包括表面清洁、表面化学改性、PDMS键合、粘合前的表面准备,以及通过活化、接枝和表面涂层对聚合物和生物材料进行表面处理。我们一共有3款型号可供选择,标配为派瑞克斯玻璃舱,可选配高纯度石英舱,射频频率是13.56MHz。
Part 1设备展示
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